TLR4对氧化低密度脂蛋白作用巨噬细胞后凋亡和炎症因子的影响

作者：石中全; 李国利; 胡艳玲; 马丽华

来源：中国免疫学杂志, 2018, 34(07): 984-995.

• 巨噬细胞
• 凋亡
• 炎症因子
• TLR4
• ROS

目的:研究Toll样受体4(TLR4)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)作用后巨噬细胞凋亡和炎症因子的影响。方法:巨噬细胞Ana-1分为Con(不做处理)、ox-LDL(50 pg/ml ox-LDL处理)、TAK-242(50 pg/ml ox-LDL和20μmol/L的TLR4阻断剂TAK-242处理)。流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、核因子-κBp65(NF-κBp65)、TLR4蛋白水平,二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)法检测细胞中ROS水平,ELISA检测培养液上清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平。结果:ox-LDL处理后的Ana-1细胞中TLR4表达水平升高,而TLR4阻断剂TAK-242可以部分降低细胞中TLR4水平。ox-LDL细胞凋亡率从(6.12±0.95)%升高到(45.35±2.71)%,而TAK-242作用后的凋亡率降低至(29.59±4.23)%,同时ox-LDL细胞中Bax、Cleaved Caspase-3、NF-κBp65水平和ROS水平均明显高于Con(P<0.05),而TAK-242细胞中Bax、Cleaved Caspase-3、NF-κBp65水平ROS水平均明显低于ox-LDL(P<0.05)。ox-LDL细胞培养液上清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显高于Con(P<0.05),而TAK-242细胞培养液上清中TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显低于ox-LDL(P<0.05)。结论:巨噬细胞经过ox-LDL作用后细胞中TLR4表达升高,细胞凋亡增多,细胞分泌的炎症因子水平升高,细胞中ROS水平和NF-κBp65水平均升高,而敲低TLR4能够抑制ox-LDL的上述作用。

• 单位
  重庆三峡医药高等专科学校