稳定表达水通道蛋白-4 HEK293细胞株的建立及应用

作者：赵忙所; 孙朝晖; 耿同超

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2010, (01): 68-70.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.005349

• AQP4
• HEK293细胞
• 间接免疫荧光法
• 视神经脊髓炎

目的:建立稳定表达水通道蛋白-4(AQP4)的HEK293细胞株,并以其检测12例视神经脊髓炎患者血清中是否存在AQP4抗体。方法:从颞叶癫痫患者脑组织提取总RNA,RT-PCR扩增AQP4的cDNA,构建AQP4-绿色荧光蛋白(GFP)融合表达重组体pEGFP-N1-AQP4,转染HEK293细胞,抗生素筛选联合流式细胞仪分选筛选稳定表达细胞株,RT-PCR和间接免疫荧光法鉴定AQP4的表达,激光共聚焦显微镜观察AQP4在细胞中的定位,并以已建立的细胞为底物间接免疫荧光法检测12例视神经脊髓炎患者血清中是否存在AQP4抗体。结果:经PCR、双酶切、测序鉴定证实成功获取AQP4的cDNA,AQ...

• 单位
  清华大学玉泉医院