M2型丙酮酸激酶对瘢痕疙瘩成纤维细胞功能的影响

作者：杨怡圆; 周仁鹏; 候家琳; 王麒瑞; 梁奕敏; **茹^*

来源：组织工程与重建外科, 2020, 16(05): 351-358.

• M2型丙酮酸激酶
• 瘢痕疙瘩
• 成纤维细胞
• 糖酵解
• 增殖

目的探索M2型丙酮酸激酶(Pyruvate Kinase M2,PKM2)对瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖、糖酵解以及胶原合成的影响。方法应用免疫组化染色检测正常皮肤组织和瘢痕疙瘩组织中PKM2及增殖相关标记物(Ki67)的表达;应用Real-time PCR检测正常皮肤来源成纤维细胞和瘢痕疙瘩来源成纤维细胞中PKM2及纤维化指标(COL1A1、COL1A2、COL3A1)的表达;应用Western-blot检测正常皮肤来源成纤维细胞和瘢痕疙瘩来源成纤维细胞中PKM2的表达;应用Seahorse XF技术检测正常皮肤来源成纤维细胞和瘢痕疙瘩来源成纤维细胞的糖酵解功能。使用PKM2抑制剂处理瘢痕疙瘩成纤维细胞后,应用CCK-8、Ed U标记方法检测细胞增殖的变化,Seahorse XF技术检测细胞糖酵解功能的变化,Western-blot检测细胞中纤维化指标(Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原)的表达变化。结果 PKM2、增殖相关标记物(Ki67)在瘢痕疙瘩组织中的表达较正常皮肤组织中明显升高;瘢痕疙瘩成纤维细胞中的PKM2、Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达水平均显著高于正常皮肤成纤维细胞;与正常皮肤成纤维细胞相比,瘢痕疙瘩成纤维细胞的糖酵解功能显著上调。PKM2抑制剂处理后,瘢痕疙瘩成纤维细胞增殖能力明显受到抑制、糖酵解功能显著下调、Ⅰ型胶原纤维表达显著减少。结论瘢痕疙瘩成纤维细胞高表达PKM2,抑制PKM2可能是临床治疗瘢痕疙瘩的新途径,值得进一步深入研究。

• 单位
  上海交通大学医学院附属第九人民医院