APE1基因RNAi慢病毒载体的构建与鉴定

作者：李艳菊; 郑智华; 刘景丰; 高美钦; 黄爱民

来源：福建医科大学学报, 2010, (02): 86-90.

• 癌
• 肝细胞
• 内切核酸酶类
• 嘌呤类
• 嘧啶类
• 肝肿瘤
• RNA干扰
• 慢病毒属
• 遗传载体 carcinoma
• hepatocellular
• endonucleases
• Purines
• Pyrimidines
• liver neoplasms
• RNA interference
• lentivirus
• genetic vectors

目的构建APE1基因慢病毒载体,为其后续的体内外实验研究提供基础。方法应用基因工程技术,筛选出两条针对APE1基因的RNAi靶序列KD1、KD2,分别与pGCIL-GFP载体连接,经转化筛选鉴定后,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,分别命名为LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2,两种病毒颗粒分别感染MHCC97-H细胞,设为感染LV-APE1-shRNA1、LV-APE1-shRNA2细胞组,同时设未感染病毒组和感染空载体细胞组。Real-time PCR和Western blot检测MHCC97-H细胞中APE1基因的mRNA和蛋白的表达。结果 PCR及测序结果与预期结...

• 单位
  福建医科大学附属第一医院; 福建医科大学