重组烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ片段的原核表达

作者：韩丹丹; 史利宁; 李芳秋; 胡毓安; 廖红; 李伟; 张国勇

来源：临床检验杂志, 2013, (09): 687-690.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2013.09.002

• 烟曲霉
• 二肽基肽酶Ⅴ
• 肽段
• 原核表达 Aspergillus fumigatus
• dipeptidyl peptidases Ⅴ
• fragment
• prokaryotic expression

目的筛选抗原性强的烟曲霉二肽基肽酶Ⅴ(dipeptidyl peptidasesⅤ,DPPⅤ)肽段并进行原核细胞表达。方法通过生物信息学分析技术,从DPPⅤ全长序列中选取抗原决定簇密集的片段,采用生物合成和PCR技术,获得其肽段相应的DNA序列,并克隆至测序载体;DNA测序验证后构建重组表达质粒,转染原核表达宿主菌BL21(DE3),IPTG诱导表达后用Talon亲和层析柱纯化;western blot分析产物免疫反应性。结果 DPPⅤ19～144p及DPPⅤ145～447p在大肠埃希菌中均以包涵体形式表达,DPPⅤ19～447p以可溶性蛋白质形式表达。western blot结果表明筛选出的...

• 单位
  江苏大学; 中国人民解放军东部战区总医院