痛泻要方含药血清对结肠癌HCT116细胞周期及凋亡的干预作用及机制研究

作者：蒋义芳; 胡艳娥; 杨懿; 付西; 祝捷; 由凤鸣^*

来源：世界科学技术-中医药现代化, 2023, 25(10): 3221-3229.

• 痛泻要方
• 结肠癌
• 细胞周期
• 细胞凋亡
• 磷脂酰肌醇
• 3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路

目的 观察痛泻要方含药血清对结肠癌HCT116细胞周期及凋亡的影响，并探讨其可能的生物学机制。方法 将结肠癌HCT116细胞分为不同浓度空白组和痛泻要方含药血清组，采用细胞增殖与活性检测-8(CCK8)法检测24、48和72 h各组对HCT116细胞活力的影响；使用流式细胞术检测不同浓度痛泻要方含药血清诱导HCT116细胞凋亡及周期阻滞的作用；通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测经不同浓度痛泻要方含药血清干预后细胞周期调控蛋白P21(P21)、细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)、细胞周期蛋白依赖性激酶-1(CDK1)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）、磷酸化磷脂酰肌醇-3-激酶（p-PI3K）、蛋白激酶B(Akt)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达的变化。结果 CCK8结果显示，与10%空白组相比，10%痛泻要方含药血清仅在48 h对HCT116细胞活力具有明显抑制效应（P<0.01）；与20%空白组比较，20%痛泻要方含药血清在48和72 h可抑制HCT116细胞活力（P<0.01,P<0.05），且空白血清含量增加并不会抑制细胞活力，故后续实验选择10%空白血清、48 h作为药物对照和干预时间；流式细胞术表明，与空白组相比，10%和20%痛泻要方含药血清干预48 h后能将HCT116细胞周期阻滞在G2/M期（P<0.01），并诱导HCT116细胞凋亡（P<0.05），且与药物浓度呈正相关；同时，Western blot结果显示，痛泻要方含药血清能够不同程度上调P21、Bax表达，下调Cyclin B1、CDK1、Bcl-2、p-PI3K、p-Akt表达（P<0.05,P<0.01）。结论 痛泻要方能够抑制结肠癌HCT116细胞增殖并诱导其凋亡，其机制可能与抑制PI3K/Akt信号通路有关。

• 单位
  成都中医药大学; 成都中医药大学附属医院