摘要
目的:观察艾灸预处理对早发性卵巢功能不全(POI)大鼠卵巢功能、生育力及卵巢颗粒细胞凋亡的影响,探讨艾灸预处理对POI大鼠卵巢功能的保护作用及其抗凋亡效应机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组和预灸组,每组14只。预灸组造模前予14 d温和灸干预,“肾俞”和“关元”“中脘”两组穴位隔日交替进行,每日1次,每次10 min。采用雷公藤多苷混悬液75 mg·kg-1·d-1灌胃14 d制备POI大鼠模型。观察大鼠动情周期、妊娠率和胚胎数量,称量卵巢湿重并计算卵巢指数;HE染色观察卵巢组织形态学变化及卵泡计数;ELISA法检测大鼠血清雌二醇(E2)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、抗苗勒管激素(AMH)含量;TUNEL染色观察卵巢颗粒细胞凋亡率;免疫组织化学法和实时荧光定量PCR法分别检测卵巢组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3和Caspase-9蛋白和mRNA表达水平。结果:与空白组相比,模型组动情周期紊乱,妊娠率和胚胎数量降低(P<0.01);卵巢湿重及卵巢指数降低(P<0.01),总卵泡数及各级卵泡数量均减少(P<0.01,P<0.05),闭锁卵泡数量增多(P<0.01);血清E2、AMH含量降低(P<0.01),FSH、LH含量升高(P<0.01);卵巢细胞凋亡率升高(P<0.01);卵巢Caspase-3和Caspase-9蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01)。与模型组相比,预灸组动情周期紊乱大部分恢复正常(P<0.01),妊娠率和胚胎数量升高(P<0.01);卵巢湿重升高(P<0.01),总卵泡数及初级卵泡数量增多(P<0.05),闭锁卵泡数减少(P<0.01);血清AMH含量升高(P<0.05),FSH含量降低(P<0.05);卵巢细胞凋亡率降低(P<0.05);卵巢Caspase-3和Caspase-9蛋白及mRNA表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论:艾灸预处理可以减少卵巢颗粒细胞凋亡,有效保护POI大鼠卵巢功能,提高生育力。
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