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摘要
【目的】构建小鼠DVL3基因野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒，验证miR-204与DVL3的靶向关系。【方法】采用生物信息学方法预测miR-204与DVL3基因的结合位点。采用PCR法扩增小鼠DVL3基因3’UTR片段，克隆至pGL3-control载体，构建野生型及突变型重组荧光素酶报告质粒。293T细胞分为6组，分别将野生型与突变型荧光素酶质粒与miR-204过表达质粒以及对照质粒共转染，检测6组细胞中荧光素酶的活性。【结果】电泳和测序结果证实成功构建小鼠野生型和突变型DVL3基因重组荧光素酶报告质粒；双荧光素酶活性检测结果显示，野生实验组相对荧光素酶活性比野生对照组和NC组均降低，且差异具有统计学差异(P<0.05)。【结论】成功构建小鼠野生型和突变型DVL3基因重组荧光素酶报告质粒，miR-204与DVL3存在靶向关系。
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单位天津市疾病预防控制中心
