构建真核表达载体实现恶性疟原虫膜蛋白pfs25在CHO细胞中的重组表达

作者：陈勇; 陆俭; 李刚; 雷清; 蒋琳

来源：药物生物技术, 2013, (01): 12-16.

DOI：10.19526/j.cnki.1005-8915.2013.01.002

• 真核表达载体
• CHO细胞
• 二氢叶酸还原酶
• 弱化SV40启动子
• pfs25 CHO
• Dhfr
• Gene expression
• pfs25
• Weaken SV40 promoter

构建一种可实现外源基因高效的、适用于中华仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞的质粒表达系统,并成功实现了恶性疟原虫膜蛋白pfs25基因在CHO细胞中的表达。新构建的真核表达载体是在pBudCE4.1质粒载体上改造获得的,被命名为pCMV-WD,包含了人工合成的、完整的弱化SV40启动子与二氢叶酸还原酶(DHFR)基因组成的顺式表达元件和全新设计的多克隆位点,该载体属于CHO细胞通用载体,理论上可以实现任何外源基因在CHO细胞中的表达。基于该载体,采用定向克隆策略插入了恶性疟原虫膜蛋白pfs25基因,构建的重组表达质粒为pfs25/pCMV-WD。经zeocin抗生素和撤除H、T(次黄嘌呤、胸腺嘧啶脱氧核...

• 单位
  兰州生物制品研究所