MiR-10a*重组腺病毒促进B组3型柯萨奇病毒在心肌细胞的复制

作者：佟雷; 胡盛林; 屈允月; 钟照华^*

来源：基因组学与应用生物学, 2020, 39(10): 4845-4851.

DOI：10.13417/j.gab.039.004845

• *" name="keyword">miR-10a*
• 重组腺病毒
• B组3型柯萨奇病毒
• 心肌细胞

为了明确miR-10a*在小鼠原代心肌细胞中对CVB3复制的作用,本研究在HEK293细胞中包装带有红色荧光(mCherry)并表达miR-10a*的重组腺病毒,将其感染HeLa细胞应用荧光显微镜观察荧光表达,RT-qPCR检测miR-10a*的表达;将Ad-miR-10a*感染HeLa细胞后,再感染CVB3,观察荧光表达,RTqPCR检测CVB3 RNA的表达;将Ad-miR-10a*感染小鼠原代心肌细胞再感染CVB3-eGFP,在不同时间点观察红色、绿色荧光表达;CVB3-eGFP感染小鼠原代心肌细胞,不同时间点观察绿色荧光表达,RT-qPCR检测miR-10a*的表达。本研究成功建立带有mCherry并表达miR-10a*的重组腺病毒(Ad-miR-10a*)并在HeLa细胞中观察到红荧光表达及检测到miR-10a*过表达。Ad-miR-10a*显著促进CVB3在HeLa中的复制;同样在小鼠原代心肌细胞中,Ad-miR-10a*可以促进CVB3的复制,并且Ad-miR-10a*感染细胞与CVB3感染细胞高度重合;CVB3-eGFP感染小鼠原代心肌细胞明显促进miR-10a*的表达。综上所述,Ad-miR-10a*可在HeLa、小鼠原代心肌细胞中过表达有生物学活性的miR-10a*;Ad-miR-10a*促进CVB3在原代心肌细胞中的复制,同时CVB3-eGFP促进miR-10a*在心肌细胞中的表达,CVB3可能通过此方式获得有利于自身复制和感染的环境,推测这可能是CVB3感染引起心肌疾病的重要机制之一。

• 单位
  基础医学院; 哈尔滨医科大学