MALAT1通过调控miR-146a减轻关节软骨细胞凋亡和基质降解的研究

作者：宋超; 王冶; 蒲劲松^*; 陈林; 郭浩然; 崔瀚文

来源：现代免疫学, 2021, 41(02): 111-117.

• 骨关节炎
• 微小RNA-146a
• 转移相关肺腺癌转录本1
• 细胞凋亡

为探究转移相关肺腺癌转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对miR-146a的调控作用及其对关节软骨细胞凋亡和基质降解的影响,采用RT-PCR检测临床软骨组织中miR-146a和MALAT1的表达,分析其变化的相关性;双荧光素酶报告基因试验检测miR-146a和MALAT1的靶向作用关系;之后分组并转染miR-146a mimics或MALAT1重组过表达载体,经过IL-1β处理,采用RT-PCR检测miR-146a表达,CCK-8检测细胞增殖水平,Hoechst检测细胞凋亡水平,Western blotting检测活化型半胱天冬酶3(cleaved caspase 3,cl-CASP3)、B细胞淋巴瘤因子2(B-cell lymphoma 2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein, Bax)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、带有血小板凝血酶敏感蛋白结构域的解聚素金属蛋白酶5(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 5,ADAMTS-5)、Ⅱ型胶原蛋白(collagenⅡ,COL2)、聚蛋白聚糖蛋白水平。结果显示,相比于普通关节软骨组织,骨关节炎(osteoarthritis, OA)关节软骨组织MALAT1相对表达水平升高(P<0.05),miR-146a相对表达水平降低(P<0.05),MALAT1与miR-146a表达呈负相关(r=-0.907 8,P<0.001);双荧光素酶报告基因试验显示,miR-146a和MALAT1存在靶向作用关系;相比于IL-1β组,miR-146a组细胞增殖水平降低,细胞凋亡率及cl-CASP3、Bax相对蛋白表达水平升高,Bcl-2相对蛋白表达水平降低,同时MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平升高,COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平降低(均P<0.01);MALAT1过表达可显著降低miR-146a的表达水平,提高细胞增殖活性并抑制其凋亡,同时降低MMP-13和ADAMTS-5相对蛋白表达水平,提升COL2和聚蛋白聚糖相对蛋白表达水平(均P<0.01)。该研究提示,MALAT1可通过靶向作用于miR-146a发挥对软骨细胞的抗凋亡作用。

• 单位
  川北医学院附属医院