杉木ClLAR基因的克隆及遗传转化拟南芥

作者：王培; 张家君; 吕蒙蒙; 理挪; 马志慧; 陈宇^*; 林思祖

来源：西北林学院学报, 2019, 34(05): 1-9.

• 杉木
• ClLAR
• 基因克隆
• 序列分析
• 载体构建
• 遗传转化

为探究杉木种子发育过程中无色花青素还原酶(LAR)基因在类黄酮生物合成途径中对原花青素(PA)合成的分子调控机制,以杉木种子为试验材料,通过RT-PCR结合RACE的方法成功克隆到杉木ClLAR基因全长,该基因的cDNA全长为1 625 bp,具有1个1 242 bp的开放阅读框(ORF),编码413个氨基酸。构建pCambia3301-ClLAR植物表达载体,运用冻融法将重组质粒转至农杆菌GV3101,通过花序侵染法获得拟南芥转基因植株,利用Basta溶液和PCR验证筛选出阳性苗,确定目的基因ClLAR已整合至拟南芥基因组中。研究结果为深入分析杉木ClLAR基因调控PA合成的分子机制和ClLAR蛋白功能奠定了基础。

• 单位
  福建农林大学; 生命科学学院