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摘要
目的:探讨黏附分子CD146对组蛋白去乙酰化酶抑制剂Vorinostat诱导卵巢癌细胞凋亡作用的影响。方法:通过实时聚合酶链反应(real-time PCR)和蛋白质印迹(western blotting)法检测卵巢癌细胞A2780和SKOV3中CD146在组蛋白去乙酰化酶抑制剂Vorinostat作用下的变化情况。通过流式细胞仪(FACS)及细胞克隆形成实验检测CD146单克隆抗体AA98对Vorinostat诱导卵巢癌细胞凋亡和抑制克隆形成的影响,金氏公式法分析联合用药效果。通过Western blotting法比较Vorinostat单药及AA98与Vorinostat联用对卵巢癌细胞中蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/m TOR)信号通路及下游分子的影响。结果:在卵巢癌细胞中黏附分子CD146在Vorinostat作用下被显著性诱导表达,高表达的CD146可能与卵巢癌化疗敏感性有关。CD146单克隆抗体AA98与Vorinostat联用显著增加了卵巢癌细胞的凋亡率,降低了细胞克隆形成能力,差异有统计学意义(P<0.05)。金氏公式计算表明两药具有协同效应。AA98可明显降低Vorinostat引起的AKT/m TOR通路活化作用,降低卵巢癌细胞中磷酸化AKT(p-AKT)、磷酸化真核翻译起始因子4E结合蛋白1(p-4E-BP1)及磷酸化核糖体40S小亚基S6蛋白激酶(p-S6K1)的蛋白表达水平(P<0.05)。结论:Vorinostat使CD146显著上调,从而降低了卵巢癌化疗敏感性,CD146单抗可能通过逆转和抑制Vorinostat引起的AKT/m TOR通路活化作用,Vorinostat联合CD146单抗对卵巢癌细胞具有明显的协同杀伤效力。
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单位华中科技大学同济医学院附属同济医院; 首都医科大学附属北京妇产医院; 中国科学院生物物理研究所
