不同方法HBx基因表达质粒转染肝癌HepG2细胞的效果比较

作者：任建军; 孟兴凯; 牛剑祥

来源：中国普通外科杂志, 2014, 23(07): 936-940.

• 癌,肝细胞
• 乙型肝炎病毒X
• 转染

目的:比较Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法转染乙型肝炎病毒X(HBx)基因的表达质粒pHAHBx至HepG2肝癌细胞的转染效率及其细胞毒性。方法:分别用Lipo2000、磷酸钙法和Lonza电转法将绿色荧光蛋白(GFP)标记的pHA-HBx转染至HepG2肝癌细胞,以荧光显微镜及流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR鉴定HBx基因在HepG2细胞基因组的整合,Annexin V/PI法检测细胞的存活情况。结果:RT-PCR结果显示,外源性HBx基因通过3种转染方法均可导入HepG2细胞并表达;Lipo2000和Lonza电转法的转染效率均高于磷酸钙法(均P<0.05),而Lipo2000和Lonza电转法的转染效率间差异无统计学意义(P>0.05);细胞存活率从高到低依次为Lonza电转法、Lipo2000、磷酸钙法(均P<0.05)。结论:Lonza电转法转染pHA-HBx至HepG2肝癌细胞转染效率高,且细胞毒性小,是较好的转染方法。

• 单位
  内蒙古医科大学附属医院