化瘀通便汤调节STC大鼠结肠Cajal间质细胞自噬相关蛋白表达的实验研究

作者：满如; 于永铎^*; 陈萌^*; 张斯瑶; 姜洪宇

来源：辽宁中医药大学学报, 2022, 24(06): 23-28.

DOI：10.13194/j.issn.1673-842x.2022.06.006

• 慢性传输型便秘
• 化瘀通便汤
• Cajal间质细胞
• 自噬
• 中药量效关系

目的 该实验通过观察复方地芬诺酯诱导的慢传输型便秘（slow transit constipation,STC）模型大鼠结肠组织中Cajal间质细胞（ICCs）自噬情况，探讨化瘀通便汤治疗STC机制及其量效关系。方法 选择成年72只SD大鼠，随机分为6组，空白对照组12只大鼠给予纯净水灌胃，剩余5组用复方地芬诺酯灌胃制备慢传输型便秘大鼠模型，造模2周后随机抽取1组实验组，和空白组一起收集粪便，采用检测粪便含水率和炭末推进率的方法进行肠道功能障碍的测定。确定造模成功后除模型对照组外，3组分别给予低、中、高剂量化瘀通便汤治疗，1组给予西药治疗，模型组予等量纯水灌胃，对6组大鼠各项指标进行观察，包括大鼠一般情况（精神状况、进食量、饮水量、首次排黑便时间），利用透射电镜观察ICCs形态变化，并使用免疫组化法、免疫荧光、蛋白免疫印迹法检测ICCs及自噬相关蛋白Beclin1、Atg5、LC3B、p62的表达。结果 （1）与空白组相比，造模组大鼠一般情况较差，首次排黑便时间延长（P<0.01）。（2）相较于空白组，模型组Cajal间质细胞出现严重损伤，各干预组Cajal间质细胞的损伤均有所改善和修复，化瘀通便汤高剂量组Cajal间质细胞改善和修复最明显。（3）与空白组相比，模型组ICCs细胞结构明显改变，Beclin1、LC3B、Atg5蛋白表达上升，p62表达下降（P<0.01）；与模型组相比，低、中、高剂量化瘀通便汤组自噬相关蛋白表达均有不同程度的变化，差异有明显统计学意义（P<0.01）；高剂量化瘀通便汤与低、中组间差异显著（P<0.05）。结论 （1）运用复方地芬诺酯成功复制STC大鼠模型，且STC大鼠模型稳定性好，安全性高，可用于后期实验研究。（2）化瘀通便汤能明显改善STC症状，修复Cajal间质细胞结构，主要机制可能与下调Beclin1、LC3B、Atg5表达而调节ICCs过度自噬，上调p62表达促进ICCs修复有关，从而能刺激肠道蠕动，增加肠道水分。（3）化瘀通便汤治疗STC与用药剂量有一定联系，高剂量通便汤治疗STC效果最佳。

• 单位
  辽宁中医药大学; 辽宁中医药大学附属医院