摘要
目的探讨活性氧簇(ROS)信号通路调控核苷酸结合寡聚化结构域样受体(nucleotide binding and oligomerization domain-like receptor,NLRP3)炎症小体的表达在自身免疫性葡萄膜炎(autoimmune uveitis,AU)发生中的作用。方法健康大鼠共40只,随机分为空白对照组、模型组、空载体转染组(空载体组)和NLRP3-shRNA沉默组(沉默组)各10只;沉默组构建慢病毒载体pLenti6.3-EmGFP-NLRP3-shRNA,空载体转染组注射等量空载体,感染时间72 h。结果 ELISA结果发现,模型组和空载体组造模成功后10 d、13 d、16 d、19 d的NLRP3、IL-1β和IL-18水平显著高于沉默组,沉默组高于空白对照组(P<0.05)。免疫组织化学结果发现,模型组和空载体组12 d和20 d的NLRP3、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18阳性表达率显著高于沉默组,沉默组高于空白对照组(P<0.05)。PCR结果发现,模型组和空载体组造模成功后12 d和20 d的NLRP3 mRNA水平显著高于沉默组,沉默组高于空白对照组(P<0.05)。Western blot结果发现,模型组和空载体组造模成功后12 d和20 d的NLRP3、ASC、pro-Caspase-1、IL-1β和IL-18,硫氧还蛋白和硫氧还蛋白互作蛋白相对表达水平显著高于沉默组,沉默组高于空白对照组(P<0.05)。结论 NLRP3炎症小体及下游炎症因子表达上调可能参与了AU的发生,可能介导ROS信号通路发挥作用。
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