结核分枝杆菌荧光定量PCR检测方法建立

作者：徐菊玲; 徐伯赢; 周洪昌; 张慧; 段劲; 薛利军; 邵圣文

来源：中国公共卫生, 2011, (10): 1250-1252.

• 结核杆菌
• 16S rDNA
• 荧光定量PCR Mycobacterium tuberculosis
• 16S rDNA
• fluorescence quantitative PCR

目的探讨结核分枝杆菌实时定量检测方法并进行评价。方法针对结核杆菌(Mycobacterium tuberculo-sis,Mtb)16S rDNA基因设计引物,应用SYBR Green I建立荧光定量PCR(FQ-PCR)反应体系;提取Mtb基因组DNA,PCR扩增16S rDNA片段,构建重组质粒pMD-TB16S;检测11份肺结核患者痰标本;以甲型链球菌、大肠杆菌等基因组DNA作对照,检验方法特异性,对同一份Mtb DNA模板进行批内和批间检测,计算变异系数(CV)。结果靶向Mtb 16SrDNA基因引物能够特异扩增Mtb 16S rDNA基因,对照组细菌基因未见扩增,灵敏度为(Mtb基因...

• 单位
  湖州师范学院; 中国人民解放军东部战区总医院