非洲猪瘟病毒P30蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备

作者：刘影; 陶思锐; 舒金琪; 查银河; 舒建洪^*

来源：浙江理工大学学报, 2021, 45(05): 691-696.

• 非洲猪瘟病毒
• P30基因
• 原核表达
• 多克隆抗体

利用原核表达系统表达纯化重组非洲猪瘟病毒P30蛋白,并进一步制备抗P30重组蛋白的多克隆抗体,为非洲猪瘟病毒诊断试剂盒的研发提供实验材料和理论依据。根据GenBank中非洲猪瘟结构蛋白P30序列,经密码子优化后合成相应的基因序列,构建重组表达质粒pET-32a-P30并转化至大肠杆菌Rosetta感受态细胞中,经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达纯化后获得重组P30蛋白,并制备抗P30的多克隆抗体。结果表明:16℃、0.5 mmol/L IPTG诱导表达12 h获得质量浓度为0.6 mg/mL以上的重组P30蛋白,Western blot证实原核表达的P30具有较好的免疫原性,ELISA检测纯化后的多克隆抗体效价高达1∶5120000,且具有良好的抗原特异性。

• 单位
  医药学院; 浙江理工大学