HPV DNA纸基快速提取方法的建立与初步评价

作者：任伟绮; 陈钰; 刘仲明; 王捷^*

来源：第三军医大学学报, 2021, 43(19): 1925-1931.

DOI：10.16016/j.1000-5404.202103267

• 核酸提取
• 纸基
• 人乳头瘤病毒

目的建立一种简便快速的人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)DNA纸基提取方法并对其进行初步评价。方法以含HPV 16型基因片段的质粒为对象,结合紫外分光光度法和实时荧光定量PCR检测,对6种不同的纸材料进行选择,最终设计成方便拿取的浸蜡试纸条,对18例临床宫颈脱落细胞样本(阳性样本13例,阴性样本5例)进行HPV DNA提取检测,与常规煮沸法进行比较。结果 1张核酸结合区面积为2 mm×10 mm的浸蜡定性滤纸条所提取的临床宫颈脱落细胞样本中的HPV DNA,经实时荧光定量PCR扩增,18例临床宫颈脱落细胞样本中的13例高危型HPV阳性样本均能成功检出,与常规煮沸法结果一致。每个样本提取时间<1 min,检出限为8×102 copies/mL,相对标准偏差为1.15%。结论建立的HPV DNA纸基快速提取方法无需移液、加热和离心等操作,洗脱液可直接作为PCR扩增反应的模板,极大简化了临床宫颈脱落细胞样本中HPV DNA的提取步骤。

• 单位
  广州中医药大学; 中国人民解放军南部战区总医院