桔青霉产核酸酶P1菌种高效选育方法研究

作者：郑美娟; 郭金玲; 田毅红; 雷生姣; 吕育财; 余华顺; 姚鹃; 王栋; 龚大春

来源：化学与生物工程, 2018, 35(02): 33-37.

• 桔青霉
• 核酸酶P1
• 甲苯胺蓝
• 高效筛选
• 紫外诱变

为了提高产核酸酶P1菌种的筛选效率,研究了甲苯胺蓝-RNA(TB-RNA)平板筛选方法 ,考察了溶剂体系、甲苯胺蓝浓度、底物RNA浓度等对TB-RNA平板上核酸酶P1酶解圈的影响。结果表明,在甲苯胺蓝浓度为2.0×10-4mol·L-1、底物RNA浓度为0.1%时,于超滤水体系中29℃恒温培养,紫外诱变12h,核酸酶P1的酶活与酶解圈直径呈正相关关系。以酶解圈与菌落直径比1.71为指标,从116株诱变菌株中筛选出10株菌株;经过后期发酵验证,选育出6株优势菌株;通过发酵及遗传稳定性考察,6#菌株的酶活最高,为390U·mL-1,比原始菌株提高了29%。为工业化生产快速选育菌株提供了高效方法。

• 单位
  三峡大学; 安琪酵母股份有限公司