5/35嵌合型腺病毒载体对脑胶质瘤的抑制作用

作者：窦以河; 何裕超; 江水; 刘世海; 王衍刚; 隋爱华; 车树圣

来源：中华神经外科疾病研究杂志, 2014, 13(04): 317-321.

• 靶向溶瘤腺病毒载体
• 重组腺病毒
• 脑胶质瘤

目的通过构建一种新型腺病毒载体,验证肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL基因)治疗胶质瘤的疗效,并证实新型载体的优势。方法经美国华盛顿大学实验室授权获得Ad/35△E1-△E3,即E1和E3缺失的5型腺病毒纤维fiber被35型新型载体。利用基因重组,构建出重组腺病毒质粒Ad5/35△E1-△E3-TRAIL。氯化铯密度梯度离心纯化Ad5/35△E1-△E3-TRAIL,并并测定病毒滴度。采用逆转录酶-多聚酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光技术、蛋白质印迹法(Western blot)分别检测目的基因的表达。结果纯化后Ad5/35△E1-△E3-TRAIL的病毒滴度为1.22×1015pfu/l。重组质粒经RT-PCR都扩增出104 bp的基因片段。通过免疫荧光和Western blot等方法检测到目的基因的高效表达。结论新型腺病毒载体质粒Ad5/35△E1-△E3-TRAIL能够高效的在脑胶质瘤细胞中表达。

• 单位
  即墨市人民医院; 中心实验室; 青岛大学医学院附属医院; 焦作市人民医院