摘要
目的 应用粪菌移植方法建立心肺转流(CPB)后菌群人源化大鼠模型,通过宏基因组学测序,研究肠道菌群紊乱对CPB致肠损伤的影响。方法 选择无特定病原体级成年雄性标准偏差大鼠共30只,体重400~450 g,按照随机数字表法随机分成3组,分别为伪无菌大鼠组(S组)、伪无菌大鼠+接种健康人源粪菌滤液组(N组)和伪无菌大鼠+接种行CPB下心脏瓣膜术后患者粪菌滤液组(C组),每组10只。S组、N组和C组大鼠抗生素鸡尾酒灌胃处理,每天2次,每次2 ml,持续14 d; S组在持续14 d的灌胃处理后即为建模成功;N组、C组从第15天开始分别接受来自健康人源和行CPB下心脏瓣膜术后患者源的粪菌移植,每天2次,持续14 d。建模成功后,收集大鼠粪便-80℃贮存,利用宏基因组学测序检测大鼠肠道菌群变化;脊椎脱臼法处死大鼠,抽取静脉血、离心后留存血清,酶联免疫吸附法测定血清炎性因子白介素(IL-1β、IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量;Westernblot法检测紧密连接蛋白(ZO-1)、闭合蛋白(occludin)的表达水平;留存结肠组织,光学显微镜下观察大鼠结肠组织的形态学改变。结果 通过粪菌移植后的大鼠肠道菌群各自聚集,分区良好;与S组比较,C组和N组血清IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度均减低,ZO-1和occludin蛋白表达增加(P<0.05);与C组比较,N组大鼠术后7 d血清IL-1β、IL-6和TNF-α的浓度明显减低,ZO-1和occludin蛋白表达均增加(P<0.05)。结论 CPB下心脏手术后引起的普雷沃菌属、阿克曼菌属等肠道菌群相对丰度的增加,可导致肠黏膜屏障功能的破坏,诱导炎症反应,引发肠损伤。