piggyBac共转染系统的构建以及转座活性的验证

作者：缪辉; 刘华华; 吴传芳

来源：四川大学学报(自然科学版), 2011, (04): 943-948.

• 转座子
• piggyBac(PB)
• 共转染
• IPCR Transposon
• piggyBac(PB)
• Cotransfection
• IPCR

piggyBac(PB)转座子的末端反向重复序列(ITR)和转座酶编码序列(PBase)分别克隆于质粒PB1156、atub-pBac-K10.1TR与包含红色荧光蛋白表达序列(RFP)的质粒pmClherry-N1重组构成供体质粒(Donor);PBase与真核表达载体pEFrF-PGK重组构成辅助质粒(Helper).使用由供体质粒与辅助质粒组成的PB二元共转染系统转染HEK293细胞,结果表明该二元共转染系统具有较好的转座活性,并且在分子水平验证了转座的发生以及使用反向PCR(IPCR)定位了其中一个转座插入位点在HEK293基因组DNA上的位置.

• 单位
  四川大学