牛白血病病毒GP51蛋白在大肠杆菌中表达及胶体金免疫层析试纸条检测方法的建立

作者：宋阳威; 张鑫宇; 张常印; 吴亚力; 孙怀昌; 唐泰山; 张敬友

来源：中国预防兽医学报, 2010, (04): 272-275.

• 牛白血病病毒
• gp51蛋白
• 表达
• 胶体金
• 免疫层析法 bovine leukaemia virus
• gp51 protein
• expression
• colloid gold
• immunochromatographic assay

为了建立一种快速诊断牛白血病(BLV)的检测方法,本研究从BLV中扩增出其囊膜糖蛋白gp51基因,经测序后克隆于表达载体pET32a(+)中,构建了重组表达质粒pET32a-gp51。将其转化受体菌BL21,用IPTG诱导后表达出约42ku的目的蛋白,经western blot检测表明目的蛋白具良好的反应原性。以胶体金标记的羊抗牛IgG(Fc)抗体作为标记抗体,将纯化的His-gp51重组蛋白和羊抗牛IgG分别标记于硝酸纤维素膜上作为检测线和质控线,各部件按序装配形成快速诊断试纸条。对22份样本分别用试纸条和ELISA试验进行检测,2种方法的阳性符合率为88.9%(8/9),表明本研究建立的胶...

• 单位
  江苏出入境检验检疫局; 扬州大学