芦笋性别决定基因AoTDF1的表达及其编码蛋白与AoAMS间的互作分析

作者：扶艳艳; 刘正杰; 林春; 杨焕文^*; 毛自朝^*

来源：植物生理学报, 2021, 57(03): 643-654.

DOI：10.13592/j.cnki.ppj.2020.0461

• 芦笋
• 性别决定
• AoTDF1-P
• 基因表达
• 蛋白互作

为探究芦笋(Asparagus officinalis)性别分化基因AoTDF1在花发育中的表达模式与分子功能,本研究以四倍体‘紫色激情’两性株自交后代中雌、雄和两性株为材料, RT-PCR分别扩增AoTDF1的全长CDS(AoTDF1-P)序列及与拟南芥绒毡层发育调控AtAMS同源基因的全长CDS (AoAMS-P)序列,构建基于黄色荧光蛋白(venus)的双分子荧光互补(bimolecular fluorescence complementation, BiFC)原核表达载体,进行蛋白间互作检测;同时用RNA原位杂交法检测AoTDF1-P在花发育早期的时、空特异性表达。结果显示:AoTDF1-P在雄花和两性花的无性别分化早期(T1)的雌蕊、雄蕊和花冠中均有较高表达,在具性别分化早期(T2)降低表达;而在性别分化后期(T3)两性花的花药绒毡层中专一地表达,雄花无表达专一性,但表达量进一步降低;而在T1、T2、T3期的雌花中AoTDF1-P均无表达。共聚焦显微观测到AoTDF1-P与Ao AMS-P间产生较强的黄色荧光,且Ao TDF1-P和Ao AMS-P自身均产生较弱的黄色荧光,预示AoTDF1-P、AoAMS-P自身可形成同型聚体,相互间能形成异型聚体调控复合物,专一性地在芦笋雄花或两性花中通过调控下游基因的表达而促进雄性发育。研究为阐明AoTDF1分子机制奠定了基础。

• 单位
  云南农业大学