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摘要
目的经过临床病理学标本检测人宫颈癌组织FAT10蛋白异常高表达后,探讨上调和下调FAT10基因表达对宫颈癌细胞株SiHa细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法采用RT-PCR法检测30例宫颈癌及癌旁组织中FAT10 mRNA的表达水平,FAT10蛋白在人宫颈癌组织中的相对表达水平明显高于癌旁组织,且差异有统计学意义(P<0.05)。通过电穿孔法分别将FAT10 siRNA和重组表达载体pc DNA3.1-FAT10转染宫颈癌SiHa细胞后,G418筛选得到稳定转染细胞系。转染48h后,荧光定量RT-PCR和Western blot法分别检测细胞中FAT10 mRNA和FAT10蛋白表达水平;CCK-8检测细胞增殖,克隆形成实验观察上调和下调FAT10表达对宫颈癌细胞株SiHa的放射敏感度的影响;TUNEL法检测细胞凋亡影响;裸鼠移植瘤实验检测上调和下调FAT10表达联合X线照射对宫颈癌细胞的生长抑制作用。结果 FAT10蛋白在人宫颈癌组织中的相对表达水平明显高于癌旁组织,且差异有统计学意义(P<0.05),FAT10下调组宫颈癌SiHa细胞内FAT10基因表达明显降低,FAT10上调组明显升高。FAT10下调组宫颈癌SiHa细胞放射敏感度升高,FAT10上调组宫颈癌SiHa细胞放射敏感度降低(P<0.05)。FAT10下调组宫颈癌SiHa细胞增殖被抑制,细胞凋亡率增加(P<0.05);FAT10上调组SiHa细胞增殖能力明显增强,细胞凋亡率降低(P<0.05),FAT10下调组裸鼠移植瘤平均体积明显小于对照组(P<0.05);FAT10上调组的瘤体平均体积大于对照组(P<0.05)。20Gyγ射线照射后FAT10下调组瘤体平均体积较照射前明显减小(P<0.05);而上调组裸鼠皮下种植瘤平均体积较照射前无明显变化(P>0.05)。结论下调FAT10表达能抑制人宫颈癌SiHa细胞裸鼠移植瘤的生长,增强瘤体的放射敏感度,上调FAT10表达则使肿瘤辐射抗拒。
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单位浙江大学医学院附属妇产科医院
