IRF4与MITF协同作用于络氨酸酶启动子的相关机制

作者:宋剑; 刘学铭; 李家大; 刘化蝶; 彭震; 陈红胜; 梅凌云; 贺楚峰; 冯永
来源:中南大学学报(医学版), 2018, 43(5): 461-468.
DOI:10.11817/j.issn.1672-7347.2018.05.001

摘要

目的:探索干扰素调节因子4(interferon regulatory factor 4,IRF4)与小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)协同作用激活络氨酸酶(tyrosinase,TYR)启动子的作用机制.方法:利用荧光素酶检测、细胞免疫荧光蛋白定位、GST融合蛋白沉降技术(GST-pull down)、免疫共沉淀等多种体外细胞实验学方法,观察IRF4与MITF的协同转录激活效应、亚细胞定位和蛋白-蛋白相互作用情况.结果:IRF4与MITF蛋白共同表达于细胞核;IRF4可以增强MITF在TYR启动子上的转录激活作用,产生协同效应,而在其他MITF目标启动子上不产生;IRF4不能单独激活TYR启动子,且与丧失功能的MITF突变蛋白在TⅥ启动子上不能产生协同作用;两个蛋白之间无直接相互作用.结论:IRF4与MITF在TYR启动子上产生协同作用,该效应主要依靠MITF进行调节;两个蛋白之间的相互作用可能需要DNA参与.

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