猪圆环病毒2a型和2b型Cap蛋白的原核表达及鉴定

作者:赵婷芳; 高翠翠; 唐青海*; 赵铖; 蔡林娜; 侯鑫军; 刘婷; 全飞杨; 胡意; 刘会敬; 杨灿; 杨海
来源:湖南畜牧兽医, 2023, (01): 38-43.

摘要

为制备猪圆环病毒2a型(PCV2a)和2b型(PCV2b)Cap蛋白,用生物信息学软件优化PCV2a Cap基因和PCV2b Cap基因密码子、克隆至p ET28a载体中、转化BL21(DE3)、构建重组蛋白表达菌株,通过优化原核表达的温度、IPTG浓度等条件进行蛋白表达,采用SDS-PAGE和Western blot进行蛋白鉴定。结果显示:重组PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白的分子量约为30 k Da,在不同温度下都以包涵体形式存在,在37℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达的Cap蛋白表达量最高。试验成功制备了PCV2a-Cap蛋白和PCV2b-Cap蛋白,为制备PCV2二价疫苗及其诊断方法的研究提供了基础材料。