高氧暴露对新生鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞转分化水平的调节作用

作者：侯阿娜; 富建华; 薛辛东

来源：国际儿科学杂志, 2017, 44(04): 281-285+297.

• 肺泡上皮细胞
• 转分化
• 高氧
• 肺损伤
• 支气管肺发育不良

目的研究体内及体外高氧暴露对Ⅱ型肺泡上皮细胞(typeⅡalveolar epithelial cells,AECⅡ)转分化水平的影响,旨在阐明支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)肺上皮损伤的发生机制。方法新生Wistar大鼠生后随机分为对照组(吸入空气)和模型组(吸入氧浓度为85%),于7 d、14 d、21 d进行动物模型肺组织取材并分离AECⅡ。细胞标本检测Ⅰ型肺泡上皮细胞(typeⅠalveolar epithelial cells,AECⅠ)特异性标志物水通道蛋白5(aquaporin 5,AQP5)及AECⅡ标志物表面活性蛋白C(surfactant proteinC,SP-C)表达。从正常新生鼠肺分离的AECⅡ在体外原代培养24h后随机分为常氧组(21%O2)和高氧组(85%O2),培养48 h后收集细胞,应用免疫荧光双标染色观察AQP5和SP-C表达及定位,Western blot方法检测AQP5和SP-C蛋白表达水平,荧光实时定量PCR方法检测AQP5和SP-C mRNA表达水平。结果 BPD模型组大鼠AECⅡ中AQP5蛋白表达从7 d开始较对照组增多,SP-C蛋白表达从14 d开始较对照组减少。模型组中AQP5 mRNA从7 d开始表达增多,SP-C mRNA从7 d开始表达减少(P<0.05),且随高氧暴露时间延长两组间差异更加显著。由正常新生鼠肺分离的AECⅡ进行体外原代培养后,免疫荧光双染可见高氧组较常氧组AQP5表达增多,SP-C表达减少,双染细胞明显增多。蛋白和mRNA定量检测结果均提示高氧组较常氧组AQP5表达增多,SP-C表达减少(P<0.01)。结论无论体内还是体外高氧暴露下,AECⅡ特异性标志物SP-C表达下调,而AECⅠ特异性标志物AQP-5表达上调,提示AECⅡ过度转分化参与高氧肺损伤后的修复过程。

• 单位
  中国医科大学附属盛京医院