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摘要
目的探讨雌激素通过Nrf2/ROS信号通路对正常乳腺上皮细胞生物学改变的诱导作用。方法选取正常乳腺上皮细胞株MCF-10A和MCF-12A,实验设立空白组和雌激素组(5 nmol/L)。分别采用MTT法、LDH实验、酶联免疫吸附测定法(ELISA)、DCFH-DA荧光探针标记法和氧化酶活性测定、划痕实验、平板克隆实验、AnnexinV/PI双染色法检测干预后乳腺细胞的生物学表现;Western blot和PCR检测乳腺细胞中Nrf2、HO-1、NQO1蛋白及mRNA表达水平。结果雌激素可诱导细胞活力、迁移和克隆能力的增强,同时降低细胞凋亡水平。雌激素可以诱导ROS的积累,抑制细胞中SOD、GPX、CAT和TAC等氧化酶的活性,进而促进细胞中LDH和8-OHdG的水平升高,导致细胞毒性和DNA氧化损伤增加。此外,Western blot和RT-qPCR结果表明,雌激素诱导后可抑制Nrf2、HO-1和NQO1的表达。结论雌激素可以诱导正常乳腺细胞的增殖和降低细胞凋亡,并通过调节Nrf2/ROS信号通路来增加DNA的氧化损伤,进而诱导乳腺细胞的生物学改变。
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