连翘提取物调控miR-223-3p对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤的影响

作者：陈丹; 胡浚伟; 李红叶; 冯斌^*

来源：中草药, 2021, 52(24): 7561-7568.

• 连翘提取物
• 肺炎链球菌
• 肺泡上皮细胞A549
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的探讨连翘提取物对肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞A549损伤的影响及其可能作用机制。方法采用肺炎链球菌感染肺泡上皮细胞A549建立细胞损伤模型,不同剂量的连翘提取物处理细胞;微小RNA-223-3p(micro RNA-223-3p,miR-223-3p)特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-223-3p)及其阴性对照序列(anti-miR-NC)分别转染至A549细胞后用肺炎链球菌培养细胞;miR-223-3p寡核苷酸模拟物(miR-223-3p mimics)转染至A549细胞后用连翘提取物处理细胞,然后用肺炎链球菌培养细胞。MTT、流式细胞术分别检测细胞增殖与凋亡能力;ELISA法检测白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、γ干扰素(interferonγ,IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)的水平;qRT-PCR法检测miR-223-3p的表达量;Western blotting法检测活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(cleaved cysteinyl aspartate-specific protease-3,cleaved Caspase-3)蛋白表达量。结果连翘提取物能够以剂量相关方式增强肺炎链球菌感染的A549细胞活力(P<0.05),升高IL-10水平(P<0.05),降低细胞凋亡率和cleaved Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05),还可降低miR-223-3p的表达量和IL-6、INF-γ、TNF-α的水平(P<0.05);转染anti-miR-223-3p后感染肺炎链球菌的A549细胞活力和IL-10的水平升高(P<0.05),细胞凋亡率和cleavedCaspase-3蛋白水平降低(P<0.05),IL-6、INF-γ、TNF-α的水平降低(P<0.05);转染miR-223-3pmimics可逆转连翘提取物对肺炎链球菌感染的A549细胞增殖、凋亡及炎症反应的作用。结论连翘提取物可能通过抑制miR-223-3p的表达而促进细胞增殖及抑制细胞凋亡、炎症反应从而减轻肺炎链球菌感染的肺泡上皮细胞损伤。

• 单位
  驻马店市中心医院; 黄淮学院; 河南中医药大学