微小RNA-487a-3p通过抑制磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路调控脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭

作者：黄薇薇; 杨福伟^*

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(10).

• 脑胶质瘤
• 微小RNA
• 增殖
• 迁移
• 侵袭
• 磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B信号通路

目的探究微小RNA(miRNA, miR)-487a-3p对脑胶质瘤细胞(U-87 MG)的增殖、迁移和侵袭能力的调控作用及信号通路机制。方法利用GEO2R分析工具对基因表达数据库(GEO)的数据集(GSE165937)进行比较分析获得差异表达miRNA。通过定量聚合酶链式反应(qPCR)在HA1800和U-87 MG细胞系中检测miR-487a-3p的表达水平。通过在U-87 MG细胞中转染miR-487a-3p模拟物(miR-mimic)上调其表达并应用qPCR进行验证。分别通过细胞计数试剂盒8(CCK-8)、Transwell迁移实验和Transwell侵袭实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和总蛋白激酶B(t-Akt)的表达水平, 通过计算比值评价各组细胞中磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路的激活水平。两组间比较采用t检验进行统计学分析。结果共有62个差异表达miRNA(Log2│差异倍数│>2, P<0.05), 其中上调9个, 下调53个, miR-487a-3p在肿瘤组中表达水平显著下降(Log2差异倍数=-2.527, P<0.01)。与HA1800细胞比较, 在U-87 MG细胞中miR-487a-3p的表达显著下调(0.090±0.022比1.000±0.205, t=7.659, P<0.05)。在U-87 MG细胞中转染miR-mimic可以显著上调miR-487a-3p的表达(89.730±16.800比1.000±0.351, t=9.146, P<0.05)。miR-mimc组中U-87 MG细胞的增殖(24 h, 0.600±0.034比0.831±0.043, t=7.268, P<0.01;48 h, 1.098±0.058比1.624±0.074, t=9.708, P<0.01;72 h, 1.615±0.055比2.252±0.096, t=9.959, P<0.01)、迁移(97.750±9.575比226.600±19.360, t=10.330, P<0.01)和侵袭(74.330±9.501比158.600±14.440, t=8.444, P<0.01)能力被显著抑制。miR-mimc组中U-87 MG细胞的PI3K/Akt信号通路水平被显著抑制(0.211±0.384比1.000±0.000, t=35.610, P<0.01)。结论 miR-487a-3p可以通过抑制PI3K/Akt信号通路抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

• 单位
  吉林大学中日联谊医院