反相高效液相色谱法测定枯草菌肽的含量及纯度

作者：杨彩霞; 吴金梅; 何涛

来源：安徽农业科学, 2022, 50(02): 206-210.

• 枯草菌肽
• 反相高效液相色谱法
• 含量
• 纯度
• 定量检测

[目的]建立枯草菌肽含量及纯度的反相高效液相色谱(RP-HPLC)检测方法。[方法]采用ZORBAX 300SB-C8(4.6 mm×150 mm, 5μm),以三氟乙酸-水(1∶1 000)为流动相A,以三氟乙酸-水-乙腈(0.85∶200∶800)为流动相B;柱温25℃,检测波长280 nm,流速1.0 mL/min,进样量20μL,线性梯度洗脱。[结果]在室温条件下,枯草菌肽溶液12 h内稳定,RSD为0.61%;枯草菌肽主峰保留时间和峰面积的RSD分别为0.18%和0.22%,不同实验员间的RSD为0.92%;枯草菌肽的定量限(LOQ)为120 ng、检出限(LOD)为80 ng,在0.031 25～2.000 00 mg/mL线性关系良好(R2=1);平均回收率为101.49%(n=9),RSD为0.29%;改变柱温、流速和色谱柱批号,枯草菌肽理论塔板数均大于2 000,分离度均大于1.5,相对保留时间(RRT)偏差绝对值均不大于20%。测定3批枯草菌肽含量分别为98.8%、99.8%和100.2%;纯度均大于99%。[结论]该研究建立的检测方法灵敏、准确、专属性强,符合定量检测枯草菌肽含量和纯度的要求,适用于枯草菌肽的质量控制。

• 单位
  河南牧业经济学院