摘要
目的 基于高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)特征图谱评价不同产地猪苓质量的研究。方法 基于HPLC建立了一种简便、可靠、重现性好的中药猪苓特征图谱和指纹图谱分析方法,对不同来源的猪苓药材及饮片样品进行分析。在特征图谱中共确定了10个特征峰,并将其应用于猪苓药材及饮片的真伪鉴定。将HPLC特征图谱与指纹图谱相结合应用于猪苓真伪鉴别和质量评价。结果 应用HPLC-大气压化学电离源(atmospheric pressure chemeical ionization source, APCI)-IT-飞行时间法(time of flight, TOF)-质谱法(mass spectrometry, MS)法对猪苓的主要成分进行鉴定,共鉴定了8个化合物,其中在特征图谱中指认了4个色谱峰,在指纹图谱中指认了4个色谱峰。对不同产地猪苓的HPLC特异性色谱图进行分析,发现10个特征峰。峰1、9经HPLC-APCI-IT-TOF-MS鉴定为6,9-环氧麦角-7,22-二烯-3β-醇和(22E,24R)-麦角-7,22-二烯-3β,峰2、7经与标准品保留时间比较鉴定为麦角甾-4,6,8,22-四烯-3-酮和麦角甾醇。对不同猪苓样品的HPLC指纹图谱进行分析,发现9个共有峰。其中4个成分采用HPLC-APCI-IT-TOF-MS法鉴定。峰4、5、8、9分别为22、23-环氧-3β、14α、20β、24β-四羟基麦角酮-7-en-6-酮、polyporusteroneA、(20S,22R,24R)-16、22-环氧-3β、14α、23β、25-四羟基麦角酮-7-en-6-酮和polyporoidA。比较了不同猪苓的色谱图谱,其中发现10个峰为特征峰,7个峰为参考峰。计算每个特征峰与参考峰的相对保留时间,如下:0.831(峰1),0.849(峰2),0.886(峰3),0.906(峰4),0.927(峰5),0.972(峰6),1.000(峰7),1.050(峰8),1.080(峰9),1.199(峰10)。32批样品的色谱图中含有与参考色谱图相同的共有峰,且相对保留时间符合要求,说明所有样品都是真实的,可以使用特异性色谱进行真实性鉴定。结论 HPLC特征图谱为猪苓的综合质量控制提供了一种科学、实用的新方法,为不同地区猪苓的种类鉴定和综合质量评价提供了依据,对保证猪苓药材质量和临床药效都有积极的意义,从而建立了较为完善的猪苓质量标准方法。
-
单位广东三九脑科医院; 广州中医药大学第一附属医院