摘要

柑橘几丁质酶基因cs8g01810位于第8染色体上,它可能在柑橘抗真菌病的过程中起重要作用,为了在柑橘的抗病育种中快速鉴定该基因,需要开发与该基因紧密连锁的分子标记。本研究通过在柑橘基因组测序数据库中检索,获得该基因上游50 kb和下游50 kb的基因组DNA序列,再使用SSRIT软件寻找这段序列中的短串联重复序列,从而设计引物扩增,筛选获得基因连锁的SSR分子标记。以甜橙、砂糖橘、贡柑、沃柑4个品种的基因组DNA作为模板进行PCR扩增,将产物进行电泳比较和测序验证后,开发出4个与柑橘cs8g01810基因紧密连锁的SSR分子标记,它们与cs8g01810基因的物理距离在11 kb~47 kb之间,扩增产物长度在70~212 bp之间,在不同柑橘品种中长度变异在2~9 bp之间,通过PCR扩增和3%琼脂糖凝胶电泳得到有效区分。开发的SSR分子标记将在分子辅助育种、基因图位克隆和种质资源鉴定等过程中发挥重要作用。