传染性法氏囊病病毒VPP5酵母双杂交诱饵载体的构建及互作宿主细胞蛋白的筛选

作者：王念; 张礼洲; 陈玉明; 卢珍; 高立; 高玉龙; 王永强; 高宏雷; 刘长军; 崔红玉; 李凯; 王笑梅; 祁小乐

来源：中国家禽, 2015, 37(03): 22-26.

DOI：10.16372/j.issn.1004-6364.2015.03.006

• 传染性法氏囊病病毒
• VP5蛋白
• 酵母双杂交
• 诱饵载体
• 互作蛋白

VP5蛋白是传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)编码的一种非结构蛋白,在病毒感染、释放、致病性方面起着重要作用。为了研究VP5蛋白与宿主细胞的相互作用,本试验首先将IBDV VP5基因克隆入p GBKT7,构建诱饵载体p GBGt VP5,通过自激活试验证明其没有自激活活性,对酵母细胞没有毒性。然后,运用酵母双杂交技术,从鸡胚成纤维细胞(CEF)c DNA文库中筛选与VP5互作蛋白,经初筛、测序和回转验证,获得5个互作宿主细胞蛋白,为进一步深入研究IBDV VP5与宿主互作的效应和机制奠定基础。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室