谷氨酸损伤体外培养大鼠螺旋神经元中凋亡诱导因子的表达与分布

作者：丁忠家; 唐晓旭; 陈鑫; 宋勇莉; 米文娟; 王剑; 陈福权; 邱建华^*

来源：听力学及言语疾病杂志, 2014, 22(06): 620-624.

• 螺旋神经元
• 谷氨酸
• 凋亡诱导因子
• 钙蛋白酶
• 半胱氨酸天冬氨酸3

目的观察不同浓度谷氨酸(Glu)损伤螺旋神经元中凋亡诱导因子(apoptosis inducing factor,AIF)的表达与分布变化,探讨利用谷氨酸损伤体外培养螺旋神经元是否与AIF凋亡途径相关。方法取40只出生后03天SD仔鼠螺旋神经元行体外培养,所得培养细胞平均分为正常组和10mM、20mM、40mM Glu组,正常组仅给予正常SGNs培养液培养,其余三组分别加入相应浓度谷氨酸和SGNs培养液,培养48h后,应用光学显微镜、免疫荧光染色及实时荧光定量PCR方法观察四组中SGN细胞形态、SGN中AIF的分布及AIF、钙蛋白酶(calpain)、半胱氨酸天冬氨酸3(caspase 3)的表达变化;用TUNEL法观察细胞凋亡。结果 20mM和40mM Glu组SGNs细胞形态改变和细胞凋亡明显,并伴有AIF核转位;不同浓度Glu组AIF和calpain基因表达明显高于正常组(P<0.05),但caspase 3表达无明显升高(P>0.05)。结论谷氨酸损伤体外培养的螺旋神经元过程中,AIF凋亡途径参与了细胞凋亡,calpain的高表达也促进了兴奋性神经递质对SGNs的损伤,但caspase3途径无明显作用。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院