内皮素-1促进人腹膜间皮细胞增殖诱导腹膜血管新生的机制

作者：朱楠; 贾杰爽; 杨满; 谷立杰; 王玲; 袁伟杰^*

来源：中国血液净化, 2019, 18(09): 630-634.

• 腹膜透析
• 内皮素-1
• 细胞外信号调节激酶1/2
• E26转录因子-1
• 血管内皮生长因子
• 血管生成

目的探讨激活内皮素-1(endothelin-1,ET1)导致腹膜血管新生是腹膜损伤的一种潜在的作用机制。方法培养人腹膜间皮细胞(human peritoneal mesothelial cells,HPMCs)(HMrSV5),高糖刺激HPMCs,观察ET1的变化;加入外源性ET1,Western blot检测细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)和E26转录因子-1(Ets-1)磷酸化;分别使用siRNA和封闭性抗体抑制Ets-1,通过BrdU测定HPMC的增殖;最后,通过小管形成实验,使用Image J软件分析5个随机选择的区域的总毛细管长度。结果高糖可诱导HMPC高表达ET1(2.5%,F=5.561,P=0.036;4.25%,F=4.784,P=0.008);外源性ET1诱导下,HPMC中ERK1/2的磷酸化水平显著上调(F=66.347,P=0.026);ERK1/2下游的转录因子Ets-1表达显著升高(F=110.614,P=0.031);阻断MEK-1显著消除ET1对ERK 1/2的激活(F=56.361,P=0.006);加入ETA和ETB受体抑制剂后,ETAR抑制剂可明显降低Ets-1的表达(F=131.191,P=0.039)。ET1可诱导HPMCs增殖(F=4.671,P=0.046),其可被ET1拮抗剂减弱(F=5.329,P<0.001;F=5.362,P<0.001);抗体和siRNA介导的Ets-1阻断具有相似的抗增殖作用(F=5.638,P<0.001;F=4.611,P=0.007)。因此,ET1通过ERK1/2-Ets-1信号传导途径特异性地促进HPMCs增殖。另外,ET1处理的HPMsC的条件培养基可以显著促进HPMCs中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)产生(F=11.614,P<0.001)和内皮细胞血管生成。结论 ET1通过ERK1/2-Ets-1信号通路促进HPMCs增殖,并促进VEGF产生和内皮细胞血管生成。

• 单位
  上海交通大学