本发明公开了一种谷氨酰胺肽及其制备方法与应用。该谷氨酰胺肽的制备方法包括以下步骤:谷朊粉经加热处理后添加半胱氨酸搅拌;所得料液控温调节pH值,加入蛋白酶酶解2~8h;酶解结束后将反应体系灭酶,离心收集上清液,适度浓缩后喷雾干燥或冷冻干燥,得到谷氨酰胺肽。本发明得到的谷氨酰胺肽小分子肽段占比高,同时非氮端谷氨酰胺含量超过29%,明显高于以往报道的谷氨酰胺肽。