HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄的活力

作者：刘萍; 田洪年^*; 张锁庆; 张文胜; 杨梦德; 焦云飞

来源：中国抗生素杂志, 2018, 43(12): 1521-1524.

DOI：10.13461/j.cnki.cja.006481

• 头孢羟氨苄
• 青霉素酰化酶
• 合成酶活力
• 高效液相色谱法

目的建立一种HPLC法测定固定化青霉素酰化酶合成头孢羟氨苄活力的方法。方法酶与其底物7-ADCA及D-对羟基苯甘氨酸甲酯,在20℃的溶液中,搅拌转速为250r/min条件下反应10min,通过测定反应液中头孢羟氨苄的含量,从而换算出合成酶活力的数值。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;流动相:0.02mol/L磷酸二氢钾溶液(用lmol/L氢氧化钾溶液调节pH值至5.0)-甲醇(98:2);流速:1.0mL/min;柱温:25℃;检测波长:230nm。结果头孢羟氨苄在0.24～0.39mg/mL范围内线性关系良好(r=1.0000),回收率均在99%～101%范围内,RSD为0.40%。结论该测定方法专属性强、准确可靠、重现性好,适用于青霉素酰化酶合成酶活力的检测。

• 单位
  华北制药河北华民药业有限责任公司