柚皮素通过下调Akt/mTOR信号通路抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化

作者：李琰; 刘佑晖; 蔡虎志; 陈青扬; 陈新宇^*

来源：中国病理生理杂志, 2023, 39(11): 2011-2019.

• 肾纤维化
• 温阳振衰颗粒
• 柚皮素
• NRK-49F细胞
• Akt/mTOR信号通路

目的：基于网络药理学分析和转化生长因子β1(TGF-β1)诱导的大鼠肾NRK-49F细胞模型探究温阳振衰颗粒的药物成分柚皮素通过蛋白激酶B(PKB/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路发挥抗纤维化作用的潜在机制。方法：网络药理学分析温阳振衰颗粒治疗肾纤维化的关键成分和作用靶点。Cell Counting Kit-8(CCK-8)法检测柚皮素对NRK-49F细胞的毒性作用，以及对TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化的影响。观察NRK-49F细胞形态变化；qRT-PCR实验检测NRK-49F细胞中纤维化相关因子I型胶原（Col I）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和纤连蛋白（FN）的mRNA表达；Western blot实验检测NRK-49F细胞中Col I、α-SMA、FN、Akt和mTOR的蛋白表达。结果：网络药理学的结果表明，温阳振衰颗粒的关键成分柚皮素可通过作用于Akt等靶点治疗肾纤维化。CCK-8实验结果显示，0～50μmol/L的柚皮素对NRK-49F细胞无明显毒性作用。50μmol/L的柚皮素可抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化和增殖（P<0.01），并下调Col I、α-SMA和FN蛋白的表达（P<0.01）。柚皮素抑制TGF-β1诱导的Akt和mTOR蛋白磷酸化（P<0.01）。结论：柚皮素是温阳振衰颗粒中甘草的黄酮类成分之一，可通过下调Akt/mTOR信号通路抑制TGF-β1诱导的NRK-49F细胞纤维化。

• 单位
  湖南中医药大学第一附属医院