摘要

本发明公开了一种基于核酸分子机器的比色法的耐药菌检测方法,包括如下步骤:(1)构建细菌特异性响应的双探针:将巯基修饰的双探针链1和双探针链2与纳米材料混合,调节pH,然后静置、离心,得到细菌特异性响应的双探针Probe1和Probe2;(2)制备反应液:将细菌特异性响应的双探针与反应混合物储存于离心管中,制备得到反应液;其中,所述反应混合物包括双链核酸(RNA1-RNA2-Aptamer)以及EXOIII;(3)检测细菌:将待测菌液与步骤(2)制备得到的反应液按照一定的体积比混合,进行孵化反应,并测定紫外吸收度,确定细菌种类。本发明方法以两倍的酶切速率进行信号循环放大,可以更快速鉴别医院中常见的耐药菌,整个检测过程小于4小时,灵敏度、准确度;具有良好的特异性,操作简单以及肉眼可见的优势,同时为细菌快速诊断试剂盒的研发奠定了基础。