Rap1GAP基因表达上调对HL-60细胞体内及体外侵袭能力的影响

作者：邱婷婷; 李德鹏; 李振宇; 徐开林; 祁小飞; 岑建农; 陈子兴^*

来源：中华血液学杂志, 2015, 36(07): 570-574.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0253-2727.2015.07.009

• HL-60细胞
• 基因, Rap1GAP
• 白血病浸润
• 基质金属蛋白酶类

目的探讨上调Rap1GAP基因表达对白血病细胞株HL-60细胞体外侵袭能力的影响, 并构建白血病动物模型验证体外实验的结果。方法采用实时定量PCR及Western blot法检测已构建的Venus/HL-60细胞(空载体对照组)及Rap1GAP过表达单克隆细胞株Rap1GAP/HL-60(R1、R2)细胞的Rap1GAP表达水平, Transwell方法检测空载体对照组、R1、R2细胞的体外侵袭能力, 实时定量PCR检测各组细胞MMP-9 mRNA表达, 并通过明胶酶谱法检测MMP-2及MMP-9活性;将4周龄BALB/c裸鼠进行预处理后接种白血病细胞, 观察各组裸鼠生存时间及白血病细胞在其脏器中的浸润情况。结果 R1、R2细胞的Rap1GAP表达水平分别为空载体对照组的16.2、17.3倍, 侵袭率分别为(55±5)%、(59±4)%, 显著高于空载体对照组的(14±4)%(P值均<0.001)。R1和R2细胞的MMP-9 mRNA表达水平增加, 约为空载体对照组的12.0倍。动物模型实验结果显示接种R1细胞裸鼠(R1组)生存时间为(32.00±1.85) d, R2组为(33.37±2.50)d, 空载体对照组为(43.62±2.32) d, R1组和R2组裸鼠生存时间较空载体对照组缩短(P<0.05)。R1组和R2组共有3只裸鼠出现脑膜组织浸润, 脑膜组织扩增出Rap1GAP和MMP-9基因, 空载体对照组裸鼠各脏器白血病细胞浸润不明显。结论 Rap1GAP增强HL-60细胞侵袭能力, 同时伴随MMP-9 mRNA表达水平升高, 裸鼠体内实验亦证实Rap1GAP提高了HL-60细胞体内侵袭力。

• 单位
  苏州大学附属第一医院; 徐州医学院附属医院