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摘要
目的 探究基于“精气互化”理论的填精益气中药对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)向成骨分化的影响以及其分化过程中对甲基化转移酶METTL3、WTAP、PPARγ影响的实验研究。方法 将BMSCs随机分为对照组、诱导组、填精组、益气组以及填精益气组。填精组药物为鹿茸提取液，益气组药物为黄芪甲苷，填精益气组药物为鹿茸提取液联合黄芪甲苷。使用ELISA法检测6、12、18 d各组细胞碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)含量变化；qRT-PCR法检测各组细胞METTL3、WTAP、PPARγ的基因转录；Western blot法检测各组METTL3、WTAP、PPARγ的蛋白表达。结果 ALP实验结果显示，填精益气组ALP活性优于填精组和益气组，且在第12天填精益气组的ALP活性达到了最高值；QRT-PCR及Western blot的实验结果表明，与对照组相比，各用药组甲基化转移酶METTL3和WTAP mRNA及蛋白表达水平均显著上调(P<0.01),PPARγ mRNA及蛋白表达水平显著下调(P<0.01)。结论 填精法、益气法、填精益气法对BMSCs向成骨分化均具有促进作用，可能是通过提高甲基化转移酶METTL3和WTAP表达，降低PPARγ的表达，进而促进BMSCs向成骨分化增加，向成脂分化减少而实现的。三组中填精益气组明显优于单独用药组，说明填精益气组更有效提高BMSCs增殖向成骨分化，延缓成骨细胞凋亡进程，对绝经后骨质疏松症及其并发症的防治具有指导意义。
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