Notch1通路对胶质瘤起始细胞侵袭迁移能力的影响及其机制研究

作者：易立; 周星辰; 李涛; 陶震楠; 童鹿青; 马海文; 刘沛东; 解杨; 杨学军^*

来源：中华神经医学杂志, 2018, 17(06): 541-547.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1671-8925.2018.06.001

• Notch1通路
• CXCR4
• 胶质瘤起始细胞
• 侵袭
• 迁移

目的研究Notch1通路对胶质瘤起始细胞(GICs)侵袭迁移能力的影响及调控机制。方法 (1)采用箱形图分析Bredel Brain、SunBrain数据库中正常脑组织和胶质母细胞瘤组织Notch1 mRNA的表达,采用Kaplan-Meier生存分析肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库中胶质瘤患者的预后与Hes1表达的关系,采用热图分析GEO数据库中GICs、传统普通细胞系Notch1、CXCR4的表达。(2)采用免疫磁珠分选法建立U87 GICs和U251 GICs系,免疫荧光染色检测细胞CXCR4、Notch1的表达。将U87 GICs和U251 GICs分为二甲基亚砜(DMSO)组、阴性对照无义序列(shNC)组、MK0752组、Notch1干扰序列(shNotch1)组,shNotch1组、shNC组细胞分别转染含shNotch1的重组慢病毒和对照序列,MK0752组、DMSO组细胞分别加入80 nmol/mL MK-0752和等量DMSO,Western blotting实验检测4组细胞Notch1、CXCR4、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白的表达。Transwell侵袭和迁移实验检测shNotch1组、shNC组细胞的侵袭和迁移能力。结果 (1)箱形图显示胶质母细胞瘤组织Notch1 mRNA的表达高于正常脑组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生存分析显示高表达Hes1的胶质瘤患者生存率明显短于低表达Hes1的胶质瘤患者,差异有统计学意义(P<0.05)。热图显示Notch1和CXCR4在GICs中表达高于传统普通细胞系。(2)免疫荧光染色检测显示Notch1和CXCR4在U87 GICs和U251 GICs中呈高表达并存在共定位关系。Western blotting检测显示MK0752组、shNotch1组U87 GICs和U251 GICs中Notch1、CXCR4、p-mTOR蛋白的表达低于DMSO组和shNC组。Transwell实验显示shNotch1组穿膜的平均每个视野细胞数低于shNC组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Notch1通路可以通过调控CXCR4的表达,促进GICs的侵袭迁移能力。

• 单位
  天津医科大学总医院