丹酚酸B联合重组腺病毒修饰对大鼠骨髓间充质干细胞存活和分化的影响

作者：邓菊; 朱世杰; 颜如玉; 赵海玉; 张建武^*

来源：血栓与止血学, 2020, 26(04): 561-565.

• 骨髓间充质干细胞
• 丹酚酸B
• 肝细胞生长因子
• 心肌细胞分化

目的观察丹酚酸B(SalB)联合重组腺病毒Ad-HGF修饰对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)存活、增殖及向心肌样细胞分化的影响。方法体外贴壁培养法培养MSCs;实验分单纯MSCs组、Ad-HGF组、Sal B组和Sal B+Ad-HGF组,用AO/EB染色观察细胞的存活,MTT比色法检测细胞的增殖;细胞分单纯MSCs组、5-Aza组、Ad-HGF组、Sal B组、5-Aza+Ad-HGF组、5-Aza+Sal B组、Sal B+Ad-HGF组,分别诱导MSCs,于诱导后第3周观察细胞形态变化,免疫细胞荧光检测心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43、Western Blot检测蛋白c Tn T的表达。结果培养的MSCs生长良好,AO/EB检测各组细胞生长良好,胞体及胞核正常; MTT提示从第3天开始,Ad-HGF组、Sal B组和Sal B+AdHGF组OD值较单纯MSCs组和5-Aza组显著增高(p <0.05),5-Aza组较单纯MSCs组降低(p <0.05);加入诱导剂诱导3周后,MSCs由梭形逐渐变圆,部分可见肌管样结构;细胞免疫荧光可见心肌细胞特异性蛋白Desmin和Connexin43表达,Western Blot检测见c Tn T表达,Ad-HGF转染组和Sal B组蛋白表达较单纯MSCs组增强,但较5-Aza组弱,5-Aza+AdHGF组、5-Aza+Sal B组和Sal B+Ad-HGF组较5-Aza组增强。结论 Sal B和HGF对MSCs的存活无明显损伤影响,可以促进MSCs的增殖和向心肌样细胞分化,两者联合作用效果更明显。

• 单位
  广州市红十字会医院; 暨南大学; 南方医科大学南方医院