小干扰RNA沉默垂体瘤转化基因抑制人泌乳素型垂体瘤细胞的生长

作者：刘晓东; 苗旺; 王宏勤; 赵艳; 张秀峰; 范益民

来源：中华实验外科杂志, 2014, 31(03): 560-562+696.

• 垂体瘤转化基因
• RNA干扰
• 人泌乳素型垂体瘤
• 脱噬作用

目的观察小干扰RNA(siRNA)沉默垂体瘤转化基因(PTTG)对原代培养的人泌乳素型垂体瘤细胞(HPAs)生长的影响。方法原代培养人泌乳素型垂体腺瘤细胞,稳定传代后分为3组:空白对照组、阴性对照组、siRNA-PTTG转染组,转染48 h后细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测各组细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞凋亡率;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot法测定PTTG mRNA、蛋白的表达;半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)试剂盒检测Caspase-3的活性;放射免疫法测定各组细胞上清中泌乳素的水平。结果与空白对照组及阴性对照组比较,siRNA-PTTG转染组HPAs细胞PTTG mRNA和蛋白表达明显下调,细胞增殖受到抑制[阴性对照组、转染组抑制率分别为(3.02±1.77)%、(25.38±0.11)%,P<0.05],凋亡明显增多[3组凋亡率分别为:(6.21±2.36)%、(7.23±3.56)%、(32.33±5.69)%,P<0.05],Caspase-3活性增加(P<0.05);放射免疫法显示siRNA-PTTG转染组上清中泌乳素分泌水平下降,为空白对照组的32.9%(P<0.05)。结论下调PTTG基因可抑制人泌乳素型垂体瘤细胞生长,促进其凋亡,从而降低泌乳素分泌水平。

• 单位
  重庆医药高等专科学校; 山西医科大学第一医院