白细胞介素1β促进GH_3细胞中人生长激素基因表达的机制

作者：龚凤英; 邓洁英; 史轶蘩; 张殿喜

来源：中国医学科学院学报, 2004, (03): 255-262.

• 白细胞介素1β
• 生长激素基因启动子
• GH_3细胞
• 荧光素酶

目的研究白细胞介素1β(IL-1β)对大鼠垂体GH3细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的调节机制。方法采用荧光素酶报告基因方法。建立含hGH基因启动子(-484～30bp)和荧光素酶融合基因的稳定转染GH3细胞株,然后加入IL-1β或IL-1β与胞内信号转导途径的抑制剂,通过检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量以及GH3细胞内荧光素酶的变化,反映IL-1β对GH分泌、合成、hGH基因启动子活性的影响及可能的作用机制。结果IL-1β(10～104U/ml)均能刺激大鼠垂体GH3细胞中GH的分泌和合成,102～104U/ml的IL-1β还能剂量依赖性地增加细胞中荧光素酶的表达熏最高达对照组的161%;在胞内信号转导抑制剂中,丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)特异性抑制剂PD98059(40μmol/L)和p38MAPK抑制剂SB203580(5μmol/L)均能完全阻断IL-1β促进GH3细胞中荧光素酶表达的作用,磷脂酰肌醇3激酶(PI3-K)抑制剂LY294002(10μmol/L)能部分抑制IL-1β的促进作用;Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对IL-1β的促进作用没有影响;在含不同长度hGH基因启动子序列的质粒中,IL-1β促进GH3细胞中hGH基因启动子活性的关键序列在-196～-132bp之间。结论IL-1β能增强垂体GH3细胞中hGH基因的启动子的活性,此作用可能需要激活细胞内依赖MAPK、p38MAPK和PI3-K等

• 单位
  中国医学科学院; 中国协和医科大学; 北京协和医院