环介导等温扩增技术对HPV16、58亚型进行分型检测

作者：张可欣; 杨思熙; 王丽娜; 苗光新; 刘金霞^*; 邢恩宏

来源：现代预防医学, 2019, 46(20): 3787-3807.

• 人乳头瘤病毒(HPV)
• 可视化环介导等温扩增(LAMP)
• 分型检测
• 快速检测

目的采用煮沸法处理人宫颈黏液上皮细胞,获得人乳头瘤病毒(HPV)DNA,然后再通过应用可视化环介导等温扩增(LAMP)检测技术对HPV常见基因型16、58的2个亚型进行快速诊断,探讨HPV感染和分型的快速检测技术,以指导HPV感染患者的临床诊断和治疗。方法收集承德医学院妇科宫颈脱落细胞标本104例,采用直接煮沸法提取HPV DNA。应用LAMP及聚合酶链式反应(PCR)2种诊断技术进行检测,并在LAMP扩增体系中加入钙黄绿素使产物可视化。对检测结果进行特异性和敏感度比较,并计算kappa系数对校测结果的一致性进行分析。结果成功建立了HPV16、58的可视化LAMP体系,其特异性较好,且钙黄绿素产物与电泳结果一致,HPV16、58 LAMP检测限分别为100拷贝/管和103拷贝/管,与PCR一致性较好(kappa值>0.7)且无统计学差异(P>0.05)。结论 LAMP对未经纯化的HPV核酸具有较好特异性和敏感度,且操作简单,适合应用于基层。

• 单位
  承德医学院; 承德医学院附属医院