摘要

为研发转多价抗虫棉,利用蛋白酶专性底物测定马铃薯羧肽酶抑制剂(potato carboxypeptidases inhibitor,PCI)和Cry1Ac毒素单用及混用后棉铃虫Helicoverpa armigera幼虫中肠内总蛋白酶、类胰蛋白酶、类胰凝乳蛋白酶和羧肽酶的活性、羧肽酶A(carboxypeptidase A,CPA)和羧肽酶B(carboxypeptidase B,CPB)基因的相对表达量及对棉铃虫的杀虫活性。结果表明,饲喂20μg/cm2PCI+1μg/cm2Cry1Ac、40μg/cm2PCI+5μg/cm2Cry1Ac含药饲料后,棉铃虫3龄幼虫中肠内CPA活性分别为0.20 U/mg和0.16 U/mg,显著低于对照;总蛋白酶活性均为0.15 OD·min-1·mg-1,与对照差异不显著;类胰蛋白酶活性均为0.45μmol·min-1·mg-1,均显著低于其他处理,CPB基因表达量较对照显著下调。饲喂20μg/cm2PCI、40μg/cm2PCI、1μg/cm2Cry1Ac、5μg/cm2Cry1Ac、20μg/cm2PCI+1μg/cm2Cry1Ac、40μg/cm2PCI+5μg/cm2Cry1Ac含药饲料后,CPB活性分别为0.26、0.26、0.24、0.26、0.27和0.26 U/mg,与对照差异不显著;棉铃虫3龄幼虫中肠内类胰凝乳蛋白酶活性分别为0.48、0.39、0.42、0.41、0.40和0.45μmol·min-1·mg-1,6者之间差异不显著,但均显著低于对照;棉铃虫3龄幼虫中肠内CPA基因表达量均较对照显著上调。饲喂20μg/cm2PCI+0.02μg/cm2Cry1Ac、40μg/cm2PCI+0.02μg/cm2Cry1Ac、20μg/cm2PCI+0.06μg/cm2Cry1Ac、40μg/cm2PCI+0.06μg/cm2Cry1Ac含药饲料后,棉铃虫初孵幼虫实际校正死亡率分别为66.54%、68.28%、77.74%和85.76%,均高于其预期校正死亡率,表明PCI和Cry1Ac两者对杀虫活性表现为独立作用和增效作用,两者可共同用于棉铃虫幼虫的防治。